進(jìn)口胎牛血清是一種性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。
進(jìn)口胎牛血清質(zhì)量檢定指標(biāo):
1、進(jìn)口胎牛血清內(nèi)毒素檢測(cè):凝膠法和動(dòng)態(tài)濁度法 要求內(nèi)毒素含量≤10EU/ml。
2、化學(xué)檢定:包括滲透壓(240~340)、pH(7.0~8.0)、總蛋白含量(3.5~5.0%)、血紅蛋白 (≤0.02%)。
3、進(jìn)口胎牛血清微生物檢查:細(xì)菌和真菌——直接培養(yǎng)法、噬菌體——噬斑法和增殖法 支原體——培養(yǎng)法和DNA染色法 、牛病毒——細(xì)胞培養(yǎng)法。要求均為陰性。
4、促細(xì)胞生長測(cè)定:(SP2/0-Ag14標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定)
a.大增殖濃度≥1.0×106個(gè)/ml、倍增時(shí)間≤20小時(shí) 克隆率=(陽性孔平均數(shù)/培養(yǎng)孔總數(shù))×100%。
b.貼壁效率( VERO細(xì)胞、二倍體細(xì)胞等);10%血清――50或100個(gè)細(xì)胞/孔。
c.貼壁效率(%)=(每孔克隆平均數(shù)/每孔存活的培養(yǎng)細(xì)胞平均數(shù))×100 相對(duì)貼壁效率=被測(cè)血清貼壁效率/參考血清貼壁效。
如何儲(chǔ)存和解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。
長時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此,推薦在-20℃以下儲(chǔ)存血清,并避免反復(fù)凍融。
我們建議血清應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時(shí),請(qǐng)勿超過一個(gè)月。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。
進(jìn)口胎牛血清其功效與作用有以下幾點(diǎn):
1、提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物;
2、提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力;
3、有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用;
4、是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源;
5、起酸堿度緩沖液作用;
6、提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。